products
產品分類簡要描述:產品說明本產品直接以血液為模板,用抗抑制的2×Direct PCR Master Mix 進行擴增,擴增產物直接通過電泳檢測。適用范圍1. EDTA、肝素、檸檬酸鈉抗凝方法保存的新鮮或冷凍血樣;2. 未加抗凝劑的血樣和干血;3. 血液基因組的擴增檢測。
產品介紹
本試劑盒以血液為模板直接進行DNA擴增,擴增產物可直接點樣電泳。該試劑盒中含有設計的Taq酶突變體,這些使它能夠耐受全血樣品中存在的抑制劑。在大多數抗凝劑存在下,包括肝素、檸檬酸和EDTA等,Taq酶依然擴增性能良好。由于其可以從血液直接進行擴增,免除了繁瑣的DNA提取步驟,加快了工作流程,降低了污染的風險。
產品特點
1. 簡便:無需事先對血液進行提純,直接用血液為模板擴增目的基因;
2. 高效:多數抗凝劑存在條件下,*的抗抑制能力,能有效擴增雜質較多的模板。
產品用途
1.未加抗凝劑的血液樣本;
2.添加了肝素、檸檬酸、EDTA 等抗凝劑的血液樣本;
3.血液基因組擴增檢測。
使用建議
1.使用時添加≤10%的全血為模板,若擴增不出目的條帶, 酶量可加倍。加上血液后將管中各組分輕輕混勻。
2.2mM Mg2+可以滿足絕大多數 PCR 擴增,對于某些 PCR, 為了保證較好的擴增,可調
節(jié)為 2-5mM。
保存溫度
-20℃保存。
產品組分
產品組成 | 體積 |
2 × Direct Blood PCR Buffer (with Mg2+) | 1.25ml |
dNTPs(各 10mM) | 100μl |
Direct Taq DNA 聚合酶(400U) | 100μl |
常用反應體系 (25μl):
2 × Direct Blood PCR Buffer (with Mg2+*) | 10μl |
上游引物 | 0.2-1.0 μM(終濃度) |
下游引物 | 0.2-1.0 μM (終濃度) |
dNTPs(各10mM) | 1μl |
全血 | 0.1-2.5μl |
Direct Taq DNA 聚合酶(400U) | 1μl |
ddH2O | 至 25 μl |
*Mg2+終濃度為 3.5mM
常用PCR設置
當擴增片段<3K | 當擴增片≥(推薦引物長度≥30bp) |
94℃, 1 分鐘 30 秒 94℃,20 秒 55-60℃,20 秒 30-40循環(huán) 72℃,1kb/60 秒 72℃ 5 分鐘 4℃ 保溫 | 94℃, 5 分鐘 94℃,15 秒 30-40循環(huán) 68℃,1kb/60 秒 72℃ 5 分鐘 4℃ 保溫 |