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產(chǎn)品分類抗原—抗體結(jié)合過程可分為兩個(gè)階段:*階段為特異性結(jié)合階段,此階段反應(yīng)迅速,在數(shù)秒鐘至數(shù)分鐘內(nèi)完成,但無(wú)可見反應(yīng);第二階段為可見反應(yīng)階段,歷時(shí)數(shù)分鐘至數(shù)小時(shí),此階段易受以下因素的影響。
1)電解質(zhì) 抗原抗體結(jié)合后由親水膠體變?yōu)槭杷z體,此時(shí)易受電解質(zhì)影響。通常在抗原抗體反應(yīng)中,以8.5g/L NaCl溶液作為抗原抗體的稀釋液及反應(yīng)液,其中Na+和Cl-可分別中和膠體顆粒上的電荷,使膠體顆粒的電勢(shì)下降,形成可見的沉淀物或凝集物。若無(wú)電解質(zhì)存在,則不出現(xiàn)可見反應(yīng)。但如果電解質(zhì)濃度過高,則會(huì)出現(xiàn)非特異性蛋白質(zhì)沉淀,即鹽析。
2)酸堿度 pH過高或過低都可影響抗原和抗體的理化性質(zhì)。例如,當(dāng)pH為3左右時(shí),可出現(xiàn)非特異性酸凝集。此時(shí)因接近細(xì)菌抗原的等電點(diǎn),細(xì)菌表面蛋白或其他基團(tuán)所帶的電荷消失,其間互相的排斥力喪失而導(dǎo)致凝集,影響試驗(yàn)的可靠性??乖贵w反應(yīng)一般以pH6~pH9為宜。
3)溫度 抗原抗體反應(yīng)zui適溫度為37℃。一般在15℃~40℃范圍內(nèi)進(jìn)行,在此范圍內(nèi),溫度越高,分子運(yùn)動(dòng)速度加快,增加抗原抗體接觸機(jī)會(huì),反應(yīng)速度越快,但亦容易引起復(fù)合物解離;溫度越低,反應(yīng)速度緩慢,但抗原抗體結(jié)合牢固,易于觀察。某些特殊的抗原抗體反應(yīng)需要特定的溫度,如冷凝集素在4℃時(shí)與紅細(xì)胞結(jié)合,20℃以上反而解離。
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