細(xì)胞培養(yǎng)中常見污染的是細(xì)菌、真菌和支原體污染。細(xì)胞一旦污染,大多數(shù)較難處理。接下來讓我們一起來了解在哪些情況下會造成細(xì)胞污染
一、違規(guī)操作:
1. 為節(jié)省時間,有人已經(jīng)用超凈臺四個多小時,不開紫外滅菌30min,酒精擦拭后直接開始試驗。
2. 器材或者溶液很久沒用,未檢測是否污染而直接使用;離心管多次使用,槍頭為了方便交叉使用。
3. 超凈臺不點酒精燈;點了酒精燈放在右上角,而你在左下角做試驗。
4. 不帶手套,徒手操作。
5. 細(xì)胞培養(yǎng)間配備槍式移液器、手術(shù)器械、離心機、冰箱等儀器設(shè)備以及的實驗服和拖鞋,未定期消毒,物品被帶出細(xì)胞房使用,培養(yǎng)細(xì)胞過程中使用的所有實驗用具,如移液管、一次性槍頭、一次性塑料離心管、凍存管等未按要求滅菌使用(通常需121°C高壓滅菌20分鐘后37%烤干備用)。
二、超凈臺和桌面,東西太多太亂
超凈臺不是儲物箱,什么培養(yǎng)皿、各種規(guī)格的板子、槍頭就不要堆在超凈臺,這樣就會有許多紫外線顧不到的衛(wèi)生死角。細(xì)胞房其他的桌面,切忌東西堆積如山,不要將酒精棉球、標(biāo)簽紙、牛皮紙買來后全部堆在細(xì)胞房,一不小心“飄"進你的細(xì)胞培養(yǎng)板里,細(xì)胞就會養(yǎng)不好了。
三、培養(yǎng)箱太久沒清潔
細(xì)胞污染了,并非直接扔了培養(yǎng)皿就不管了,首先你還得看看這個恒溫培養(yǎng)箱里其他培養(yǎng)皿或孔板里的細(xì)胞是否污染,如果有而且好幾個板子都有類似的污染塊,那很可能是培養(yǎng)箱中的水或者空氣污染了,得給培養(yǎng)箱做個大掃除,重新酒精消毒,照紫外;孵箱里的水,水沒了要記得加,也要隔段時間用酒精擦擦托盤。
四、細(xì)胞房人多口雜,難管理
在細(xì)胞房這種衛(wèi)生要求高,人一多不確定的因素也就多了,難以保證試驗在無菌條件下操作。出入試驗室,實驗服當(dāng)風(fēng)衣穿,不扣紐扣,不戴鞋套,就容易造成細(xì)胞污染;超凈臺做實驗時,喜歡說話聊著做試驗,要是還不帶口罩,里面就有很多細(xì)菌等著去攻擊你的細(xì)胞。